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太可怕!鱼苗期死亡率100%,水温27℃发病率最高!谨防继发感染 ▏陈昌福专栏_世界观速讯

2023-05-09 23:56:39 来源:农财宝典 大国渔业

文/ 华中农业大学 陈昌福,武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军

陈昌福老师寄语

这是关于斑点叉尾鮰病毒病及其防控方法的小文章。这种病毒病疾病主要是危害处于鱼苗和鱼种阶段的斑点叉尾鮰,这种疾病一旦发生,迄今为止没有良好的治疗疾病的方法,往往会导致极高死亡率甚至是全军覆没的结果。


(资料图片仅供参考)

对于斑点叉尾鮰的这种病毒病,除了要严格检疫外,避免病毒被鱼苗鱼种带入养殖场所之外,养殖业者就是要将自己的精力放在预防疾病上。只要是按照文章中介绍的方法,采取一些适宜的措施,成功地预防斑点叉尾鮰病毒病的发生也是可以实现的。

此前系列报道→ 斑点叉尾鮰的病毒性疾病及其免疫预防措施

摘要:本文介绍了危害斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)病毒病及其防控方法。由斑点叉尾鮰病毒(channel catfish virus,CCV)引起的斑点叉尾鮰病毒病(channel catfish virus disease,CCVD),是人工养殖斑点叉尾鮰的过程中,鱼种阶段较多发生的危害比较大的一种疾病。本文在介绍鮰疱疹病毒Ⅰ型(Ictalurid herpervirusⅠ)的特点、疾病典型症状和流行情况的基础上,提出了对斑点叉尾鮰病毒病的科学防控方法。

关键词:斑点叉尾鮰;病毒性疾病;鮰疱疹病毒Ⅰ型;防控方法

斑点叉尾鮰病毒病(Channel catfish virus disease,CCVD)是由疱疹病毒(herpervirus)引起的疾病,主要感染与危害斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus),是斑点叉尾鮰鱼种阶段暴发急性传染病,可导致很高的死亡率。2003年之前OIE(世界动物卫生组织)将斑点叉尾鮰病毒病(channel catfish virus disease,CCVD)列为二类疫病。曾列为必须向OIE申报的疫病之一。

01病原及其特征

病原是一种疱疹病毒,即斑点叉尾鮰病毒(channel catfish virus,CCV)。该病毒被国际病毒分类委员会定为鮰疱疹病毒Ⅰ型(Ictalurid herpervirusⅠ)。该病毒1968年由Fijan首次分离到,1971年,根据形态学特征被鉴别为疱疹病毒。

病毒粒子从内到外分别为:双链DNA核酸、衣壳(capsid)、被膜(tegument)、囊膜(envelope)和糖蛋白(glycoprotein)。病毒粒子大小约175~200nm,外层囊膜内含有一个直径约100nm的二十面体核衣壳,由162个壳粒组成。该病毒可以在斑点叉尾鮰卵巢上皮细胞(CCO)、鲑(Salmo salar)心脏上皮细胞(CHH-1)、日本鳗鲡(Anguilla japonica)肾脏纤维芽细胞(EK-1)、黑尻鰺(Caranx melampygus)卵巢上皮细胞(JSKG)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鳍条细胞系(GCF)、鲤(Cyprinus carpio)上皮瘤细胞系(EPC)等株化细胞上生长,还可以感染其它多种鱼类的细胞系。细胞培养病毒粒子生长温度范围为10~35℃,最适温度为25~30℃;该病毒对乙醚、氯仿、酸、热处理敏感,在甘油中保存和反复冻融都会影响病毒毒力。冻融对病毒毒力影响显著,每冻融一次将失去1/4~1/2侵染力。病毒在-75℃以下可长期保存。25℃时,病毒在池水中能存活2d,在曝气的自来水中可存活11d;4℃条件下,病毒在池水中能存活近1个月,在曝气的自来水中,可存活近2个月;病毒在池底淤泥中迅速失活,因为底泥对病毒有吸附力。

02疾病的典型症状

斑点叉尾鮰染病后出现的第一个症状是摄食活动的减弱,甚至不摄食;离群独游,反应迟钝,还可以看到患病鱼不规则地游动,无目的地打转。期间有一个短暂的激烈活动,然后是长时间的没有生气。最后,大量的鱼聚集在孵化池和池塘的边缘,并且头朝上、尾朝下悬挂着,最后沉入水底衰竭而死。

患这种疾病的病鱼皮肤及鳍条基部出血、腹部、肌肉组织有许多小的出血点。鳃苍白暗淡,有时有轻微的出血。鳃丝苍白或出血,一侧或两侧眼球突出;腹部膨大(图1),部分病鱼可见肛门红肿外突,约有1.0%的病鱼嘴部和受伤的背部可能引起黄色坏死区域。

图1示患斑点叉尾鮰病毒病的病鱼症状(全长8.3cm)

解剖检查,肌肉、肝、肾、脾等组织有出血区,脾脏往往呈浅红色、肿大;胃膨大,有粘液分泌物;肠灰白色等病理状态。在病鱼的体腔可以发现黄色的和淡血色的液体。消化道无食物。

但是,腹腔内可能充满黄色的液体。肝和肾苍白并且有少量的出血。脾通常是黑色并且有扩大的现象。使用显微镜检测时,发现病毒引起的损伤主要在肾脏。肾的分泌和造血部位可以看见出血和死的组织。在腹腔和别的部位,液体的积累主要由肾衰引起;同时,造血组织的破坏和出血导致鳃部、肝和肾的表面苍白。脾、肝、肠道、胰腺和脑的损伤要小。炎症细胞侵入到受疾病侵袭的区域,试图清除被损伤和感染的组织。

03疾病的流行规律

斑点叉尾鮰病毒容易感染斑点叉尾鮰和其他鮰。不同生长期的鱼感染后的临床症状不同,病毒在自然情况下,只是感染斑点叉尾鮰幼鱼和鱼苗,刚孵化的鱼苗的死亡率可达100%,长至8月龄后鱼很少或完全不发病。该病在水温在20℃时的潜伏期为10d,25~30℃为3d。在养殖鱼遭遇高密度养殖和运输、水污染等环境压力时,易继发其他细菌性疾病,如由柱状黄杆菌(Flavobacterium cloumnare)的感染而引起疾病,可以导致疾病流行和病鱼的大量死亡(图2)。

图2网箱饲养患斑点叉尾鮰病毒病鱼体因继发细菌病而大量死亡的情景

斑点叉尾鮰病毒的传播途径有水平传播和垂直传播两种。水平传播是通过水或寄生虫及污染物传播。水温是重要的条件致病因素,暴发流行的最佳水温为25~30℃,其中27℃的死亡率较高,低于18℃时死亡率明显下降甚至无死亡。此病主要流行于北美,目前我国虽然开展大规模的斑点叉尾鮰养殖,但由于未进行流行病学调查,因此该病的分布、发生情况尚不清楚。

04诊断方法与技术

根据流行病学、临床症状和病理变化可作出初步诊断,确诊需进一步做实验室检测。

实验室检测时单由PCR检测病原阳性结果的视为可疑。斑点叉尾鮰病毒病的诊断首先经细胞培养进行病毒分离,然后用中和试验、免疫荧光、ELISA或PCR鉴定。在细胞培养时,可取病鱼肾脏和脾脏,接种到斑点叉尾鮰卵巢细胞(channel catfish ovary,CCO),在25~30℃培养并进行分离病毒;也可以用免疫荧光或ELISA直接检测病鱼组织,快速诊断有临床症状的鱼。由于病毒仅在急性爆发期间比较容易检测到,目前尚无适合检测无症状健康鱼潜在感染的最佳方法,要排除斑点叉尾鮰病毒的存在,在疾病继往史和斑点叉尾鮰病毒血清学检测等大量工作后才能确定。

05防控措施

该病目前尚无有效的药物治疗方法,故需要以预防为主。有效防治该病应该从以下几个方面入手。

5.1消毒与检疫

消毒与检疫是控制斑点叉尾鮰病毒病流行的最有效方法,采用氯制剂作为消毒剂时,有效氯含量达到20.0~50.0mg/L时,可以很好地杀灭斑点叉尾鮰病毒。因此,可用氯制剂加强对养殖水体、鱼体和渔业用具的消毒,同时严格地执行检疫制度,控制斑点叉尾鮰病毒病从疫区传入非疫区。

5.2避免采用感染了斑点叉尾鮰病毒的鱼体作为亲鱼,进行繁殖

由于斑点叉尾鮰病毒感染亲鱼后,可通过垂直传播感染鱼苗、鱼种。因此,只有选用无抗斑点叉尾鮰病毒中和抗体和没有斑点叉尾鮰病毒病史的亲鱼用于繁殖产卵,进行繁殖。

5.3降低水温,终止斑点叉尾鮰病毒病的流行

在斑点叉尾鮰病毒病流行时,引冷水注入发病池塘,降低水温到15℃以下,可终止斑点叉尾鮰病毒病的流行,达到降低病鱼死亡率,减少斑点叉尾鮰病毒病所造成的经济损失。

5.4防止继发感染

在斑点叉尾鮰病毒病流行时,可在饵料中添加适量的与柱状黄杆菌敏感的的抗生素,防止细菌继发性感染而加速病鱼的死亡。减少应激,给予充足的溶氧;在斑点叉尾鮰病毒病流行时,应注意保持好的水质,溶氧应尽量保持在5.0mg/L以上,同时应避免一些应激性的操作,如拉网作业等,以降低病鱼的死亡率。特别注意的是,在鱼病暴发时,尽可能地避免拉鱼和运鱼。

5.5免疫防治

目前,国外已研制了灭活疫苗、弱毒苗和亚单位苗,试验证明都具有较好的免疫保护作用。但是,都因为成本较高或免疫途径不方便,而没有得到很好的推广与应用。有研究结果表明,在饲料中添加酵母多糖等免疫调节剂,或对斑点叉尾鮰注射多聚次黄甙和胞嘧啶核苷酸(poly I∶C),通过调节斑点叉尾鮰自身的免疫机能,达到增强斑点叉尾鮰对斑点叉尾鮰病毒的抗感染能力。Vanderheijden等(1996)构建了斑点叉尾鮰病毒的减毒株疫苗并申请专利;Nusbaum等(2002)将ORF59和ORF6重组构建表达载体疫苗,发现该疫苗在实验条件下,对鱼体有较强的保护力。我国迄今为止,还没有预防这种疾病的疫苗应市。

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作者:华中农业大学 陈昌福,武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军

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